BCA( bicinchoninic acid )法是目前广泛应用的蛋白定量方法。其原理与Lowery法类似:在碱性
条件下,蛋白质与Cu²⁺络合,并将Cu²⁺还原为Cu⁺。BCA与Cu⁺结合形成稳定的紫蓝色复合物,在562 nm
处具有高吸收值,且吸光度与蛋白质浓度呈正比,据此可测定蛋白浓度。
相比Lowery法,BCA法灵敏度高、操作简便、试剂及有色复合物稳定性好、受干扰物质影响小。
相比Bradford法,BCA法的主要优势是不受去垢剂影响。
BCA法在50–1000 μg/mL浓度范围内线性良好,最小检出量为25 μg/mL。