基础培养基2 ~ 8℃, 添加剂-80 ~ -20℃；混匀后2 ~ 8℃, 4周内使用完毕。

1、 提前一天用人神经细胞分化铺底工作液包被培养皿，放置于37℃恒温二氧化碳细胞培养箱中过夜。

注： 如果分化后需要染色可以将染色玻片放在孔板中 一起包被。

2、选择状态较好的神经干细胞进行分化（用于分化的神经干细胞建议不要超过第 3 代）。

3、消化传代达到90%以上的神经干细胞（神经干细胞消化培养参见人神经干细胞（贴壁）培养试剂盒说明书） ，按照1传3的比例接种在包被过神经分化铺底液的皿中，使用神经干细胞培养基培养3天，使其汇合度达到90%以上（不同细胞系需要摸索合适的汇合度进行人神经细胞分化） 。

注: 神经干细胞传代后3天汇合度未达到90% ,  不建议进行神经细胞分化。

4、更换为人神经细胞分化完全培养基 A， 每两天换液一次， 每次4mL， 培养 7 天。

5、更换为人神经细胞分化完全培养基 B， 每两天换液一次， 每次4mL， 培养 7 天。

6、更换为人神经细胞分化完全培养基 C， 每两天换液一次， 每次4mL，培养 7 天。

7、如需长期培养，使用人神经细胞分化完全培养基 C，每两天换液一次，每次4mL 。长期培养可得到成熟神经细胞。